نمونه برداری زنده و غیر زنده (فعال و غیر فعال)

نمونه برداری زنده و غیر زنده (فعال و غیر فعال)

چکیده: نمونه برداری زنده اکثرا بر روی بدن حیوانات، انسانها و هر موجود زنده دیگر صورت می گیرد که در آنها اکثرا از باکتری ها، قارچ ها و … صورت می گیرد. نمونه برداری غیر زنده بر روی جامدات و هر آنچه که جان در بدن ندارد در این گروه قرار می گیرد مانند نمونه برداری بر روی لاستیک ماشین، ساختمان، سطح فلز و…

برای نمونه برداری زنده یک بیماری قارچی سطح پوست را توضیح و مثال میزنیم.

بیماری های قارچی پوست

بیماری های قارچی یا درماتوفیت جزو بیماری‌های عفونی – مسری هستند که از منبع آلودگی انسان، حیوان یا اشیا و گیاهان آلوده به فرد در معرض خطر، منتقل و در لایه‌های سطحی و میانی پوست، موجب بروز ضایعات پوسته‌دار با لبه‌های برجسته می‌شوند که با گذشت زمان، ضمن خارش متوسط تا شدید تمایل به گسترش دایره‌ای شکل دارند.

چرا به رغم تنوع و امکان دسترسی به انواع داروهای ضد قارچ، شیوع بیماری‌های قارچی پوست همچنان یکی از علل مهم مراجعه بیماران به مراکز درمانی پوست است؟

پاسخ واضح است. اول: عدم رعایت اصول بهداشتی و درمانی. دوم: عدم توجه به درمان کامل و سوم: سهل‌انگاری در مراقبت‌های پیشگیرانه از سرایت بیماری به دیگران.

• لکه های ناشی از قارچ معمولا به رنگ قهوه ای روشن هستند. لکه های قارچی در ناحیه گردن، سینه و پشت و در بعضی موارد به صورت سفید رنگ در چهره دیده می شوند.
• لکه های ناشی از قارچ به ابعاد حدود دو یا سه سانتیمتر قطر داشته و حالت پوسته دهی مختصری نیز دارند.
• لکه های ناشی از قارچ در تمام رده های سنی دیده می شود. البته امکان بروز این بیماری در اطفال و جوانان شایع تر است. تشخیص این بیماری از طریق نمونه برداری از سطح پوست و بررسی آن به وسیله میکروسکوپ امکان پذیر است
• شکل ضایعات و شدت پیشرفت آن بستگی به نوع قارچ (انسانی یا حیوانی) دارد.

در نوع حیوانی ممکن است علاوه بر خارش شدید و درد، جوش‌های چرکی و حتی تاول‌های کوچک در سطح ضایعات وجود داشته باشد که به‌ سرعت در سطح و عمق پوست پیشرفت می‌کند. شاید به همین علت باشد که گاهی این بیماری قارچی با بیماری‌های عفونی غیرقارچی اشتباه می‌شود و بیمار صرفا تحت درمان با آنتی‌بیوتیک‌های موضعی و خوراکی قرار می‌گیرد، در حالی که استفاده از داروی ضد قارچ در این شرایط ضروری است.

اما قارچ علاوه بر نوع حیوانی و انسانی بر حسب محل بروز عفونت در بدن به انواع قارچ‌های سر، صورت، تنه، کشاله ران، مو، دست، پا و ناخن تقسیم می‌شود که هر کدام درمان‌های مجزا و مشخصی دارند، به طوری که قارچ مو به دلیل ایجاد کچلی دائم و قارچ ناخن به علت سرسختی و مقاومت، نیازمند درمان طولانی‌تر و جدی‌تری هستند، این در حالی است که نوع کشاله ران به دلیل ماندگاری کرم‌های ضد قارچ در آنجا بهتر و سریع‌تر به درمان پاسخ می‌دهد.

بنابراین نوع درمان (خوراکی یا موضعی) بر اساس نوع قارچ و محل ضایعه، توسط پزشک متخصص تعیین می شود، اما از آنجا که بسیاری از بیماری‌های پوستی از جمله اگزما می‌توانند در شکل و شمایل این بیماری آشکار شوند، انجام یک آزمایش پوستی دقیق ضروری است و بسیار اهمیت دارد که نمونه‌برداری سطحی پوست در زمانی انجام شود که قارچ‌های زنده در سطح پوست به راحتی در دسترس هستند.

از این رو، فرد مبتلا باید حداقل تا سه روز از مالیدن هر پماد ضد قارچ و حتی صابون و شامپو در محل عفونت خودداری کند تا قارچ‌ها به راحتی برای آزمایشگاه در دسترس باشند و این شاید مهم‌ترین نکته آموزشی این نوشتار باشد که کمتر مورد توجه بوده است، زیرا گزارش منفی آزمایشگاه یعنی عدم درمان و پیشرفت بیماری و حتی ابتلای دیگران.

در نمونه برداری غیر مستقیم که کار بهداشت حرفه ای بیشتر در این حیطه می باشد نمونه برداری از گازها سطح جامدات می باشد، که خود شامل روش های مختلف غیر فعال یا انتشار و روش های فعال می باشد که به شرح زیر می باشد:

شرح وسایل نمونه برداری

هدف استفاده از وسایل نمونه برداری : نمونه برداری از مواد آلاینده هوای محیط کار جهت اندازه گیری مقدار آن و بررسی های بعدی

شیوه های نمونه برداری: دو شیوه اصلی برای نمونه برداری و جمع آوری آلاینده های هوا برد وجود دارد که شامل نمونه برداری فعال یا دینامیک و نمونه برداری پسیو یا غیر فعال می باشد در روش اول، از یک حرکت دهنده هوا استفاده می شود (پمپ) و حجم معینی از هوا در فشارو درجه حرارت معین از روی جاذب استفاده می شود. در روش دوم از هیچ گونه پمپ یا به حرکت در آورنده هوا استفاده نمی شود. در این روش آلاینده های هوا برد بر اساس پدیده انتشار به درون نمونه بردار وارد شده و به دام می افتد.

انواع نمونه گیرها: فیلترها و انواع هولدرهای آن، ایمپکتور ها، ایمپینجرها، سیکلون ها، بابلرهای متخلخل، کیسه های نمونه برداری، لوله های زغال فعال

فیلترهای نمونه برداری

1- فیلترها:

انواع فیلترها: فیلترهای الیاف سلولوزی، گلاس فایبر، الیاف مخلوط ، غشایی، نوکلئوپور

 آ) فیلترهای سلولوزی: اغلب فیلترهایی که در این گروه قرار می گیرند از آزمایشگاه شیمی برای جداسازی مواد جامد از مایع استفاده می شود .حجم خاکستر آنها کم است و ضخامت آنها کمتر از 0.25 میلی متر است ارزان قیمت بوده و در اندازه های مختلف یافت می شوند. از جمله معایب آن جذب زیاد رطوبت است آنها را برای تجزیه نامناسب می سازد

ب) فیلترهای گلاس فایبر: نسبت به فیلتر های نوع قبل گران تر بوده و دارای قدرت مکانیکی  کمتری هستند . از جمله محاسن آن عبارت است از جذب کم رطوبت، تحمل دمای بالا، راندمان جمع آوری بالا، واکنش پذیری کم و در نمونه برداری در حجم های بالا از آن استفاده می شود. یکی از معایب آن نیز این است که حاوی سیلیس بوده و برای تعیین سیلیس آزاد نمی توان ازآن استفاده نمود.

پ) فیلترهای الیاف مخلوط: شامل فیلتر های مخلوط سلولز، آزبست، سلولوز، گلاس و گلاس – آزبست می باشند. فیلتر این گروه جایی که بالا بودن راندمان جمع آوری و پایین بودن افت فشار اهمیت دارد (نظیر وسایل تصفیه کننده هوا) کاربرد زیادی یافته اند.

ت) فیلترهای پلاستیکی: متداول ترین انواع آن فیلتر Micro sorban است که از الیاف پلی استیرن که قطر کمتر از یک میکرون دارد ساخته شده است . قدرت مکانیکی پایینی دارد ولی می بایست توسط یک شبکه نگه دارنده که در زیر آن قرار می گیرد حمایت شوند .

ث) فیلترهای غشایی: جایی که نمی توان از فیلترهای الیافی استفاده کرد از این فیلترها استفاده می کنند . غشاهای آلی از تشکیل یک ژل حاصل از کلوئید آلی ساخته می شود. ژل را به صورت لایه ای نازک حدود 15 میکرون که دارای منافذ یکنواخت و یکسانی است در می آورند. و به عنوان فیلتر استفاده می کنند. فیلتر های غشایی از جنس سلولز استراست، و کاربرد زیادی در نمونه برداری از هوا دارند. اخیرا فیلترهای غشایی از جنس سلولزی تری استات، نایلون، اکریلونیتریل، تفلون و نقره ساخته شده است.

ج) فیلترهای نوکلئوپور: مشابه فیلتر های غشایی اند ، زیرا منافذ آنها یکسان و یکنواخت است . منافذ این فیلترها استوانه ای شکل است و بر سطح فیلتر عمود هستند . جاذب آب نیستند و از این رو می توان از آنها برای تجزیه به روش وزنی استفاده کرد . ساختار پلی کربناته این فیلترها محکم بوده و بنابراین هنگام استفاده از آنها نیازی به تکیه گاه برای فیلتر نیست. در این فیلترها بررسی میکروسکوپِی نیز امکان پذیر است .

چگونگی انتخاب هولدر (نگه دارنده ی فیلتر) برای فیلترهای متفاوت بر حسب:

• اندازه فیلتر: برای استفاده از فیلتر می بایست از نوع مناسبی از نگه دارنده استفاده کرد. فیلترها در ابعاد متنوعی اند اما برخی از آنها تنها در یک اندازه ساخته می شوند.
• خصوصیات مکانیکی فیلترها: بعضی از نگه دارنده های فیلتر را تنها می توان برای فیلتر هایی که قدرت بالایی دارند استاده کرد. یک فیلتر محکم را می توان در نگه دارنده ی فیلتر ساده بدون صفحه ی تکیه گاه نهاد و مورد استفاده قرار داد. فیلترهای نرم نظیر فایبر گلاس و یا غشایی نیازمند نگه دارنده ای هستند که دارای صفحه تکیه گاه است تا از شکستگی فیلتر جلوگیری شود.

 2- ایمپکتورها : اصطلاح ایمپکتور به گروهی از وسایل جمع آوری کننده آئروسول ها اطلاق می شود که در آنها برخورد ذرات به یک سطح مکانیسم اصلی جمع آوری است. برخورد ذرات به سطح به آن علت اتفاق می افتد که ذرات به سب دارا بودن اینرسی از خط جریان هوا منحرف شده و از آن پیروی نمی کند. برخورد زمانی ایجاد می شود که جریان هوا در مسیر عبور خود به سطح سختی می رسد و آن را دور می زند ذرات به خاطر دارا بودن اینرسی از مسیر جریان پیروی نکرده و به سطح برخورد می کنند و به دام می افتند. هوای حاوی ذرات از نازل عبور کرده و به صفحه جمع آوری کننده برخورد می کنند (این صفحه عمود بر محور نازل می باشد). جریان هوا در چنین وسیله ای خطی است و ذرات در نازل شتاب می گیرند و سرعت یکسان و یکنواخت به دست می آورد. در خروجی نازل جریان هوا منحرف می شود. ذرات درشت به سطح برخورد کرده و به دام می افتد . ذرات ریزتر که اینرسی کافی را نداشته اند از جریان هوا پیروی کرده و مانع را دور میزنند این وسیله برای تعیین غلظت اندازه ذرات ساخته شده است واز یک سری چهاریا شش تایی جت هوا تشکیل شده است که بر صفحاتی عمود می باشند . روزنه جت ها به طور متوالی کوچکتر شده و این امر باعث می شود که ذراتی که  اندازه های مختلفی دارند بر روی صفحات جداگانه ای جمع آوری شوند.

 ذرات درشت تر بر روی صفحه اول و ذرات ریزتر به ترتیب کاهش قطر بر روی صفحات بعدی قرار می گیرند. نمونه های جمع آوری شده به کمک میکروسکوپ شمارش شده و یا وزن ذرات ته نشین شده بر روی صفحات سنجش و حتی به روش های شیمیایی تجزیه تعیین مقدار می گردند. عملکرد ایمپکتورها به جهت جریان فاصله روزنه از صفحه برخورد، شکل نازل، و و ذره دارد.

میجت ایمپینجر شیشه ای و میجت بابلر شیشه ای

3– ایمپینجرها (بطری های گاز شوی ساده): این ظروف یکی از پر مصرف ترین وسایل نمونه برداری از هوای آلوده به شمار آمده و متشکل از بطری های شیشه ای با اندازه های جاذب قرار دارد و تقریبا تا انتهای ظرف ادامه دارد وارد جاذب گشته و پس از عبور از درون جاذب، از مجرای خروج، خارج می گردد. عبور اجباری هوا از درون جاذب موجب می گردد که هوا، گازها و بخارات همراه خود را در آن به جای گذارد. این بطری ها از نظر اندازه به سه نوع دیده می شوند : ایمپینجر بزرگ (گرین بورگ اسمیت)، متوسط (مید جت ایمپینجر)، و کوچک (میکرو ایمپینجر).

آ- ایمپینجر بزرگ: این ایمپینجر طرح اصلی و اولیه ایمپینجر است که جهت جمع آوری گرد و غبار طراحی گردید اما پس از مدتی به طور گسترده برای جمع آوری فیوم ها و بخارات به کار گرفته شد. حجم این ایمپینجر 500 میلی لیتر است.

ب- ایمپینجر متوسط: این وسیله یکی از پر مصرف ترین وسایل نمونه برداری محسوب می شود. اگر چه طرح اولیه این وسیله جهت نمونه برداری آئروسول ها بوده اما امروزه بیشتر جهت نمونه برداری از گازها و بخارات کاربرد دارد. حجم این ایمپینجر 300 میلی لیتر است. این وسیله کوچک جهت نمونه برداری از منطقه تنفسی مناسب می باشد و توسط کارگر قابل حمل است.

4– سیکلون ها: سیکلون ها از مهمترین وسایلی هستند که بر اساس خاصیت گریز از مرکز به جمع آوری ذرات می پردازند. این وسیله و مکانیسم آن یکی از موثرترین روش های نمونه برداری است و به همین دلیل در مقیاس صنعتی به طور وسیعی مورد استفاده قرار می گیرد. سیکلون ها به صورت پلاستیکی و آلومینیومی می باشند که اندازه های کوچک آن برای نمونه برداری و اندازه های بزرگ آن برای پلاک سازی هوای محیط مورد استفاده قرار می گیرد. سیکلون ها مخروط ناقص فلزی یا پلاستیکی است که هوای حاوی ذرات از روزنه ای در آن وارد شده و پس از حرکت مارپیچ به طرف پایین، سرانجام به واسطه تغییر مسیر در انتهای سیکلون از قسمت بالای آن خارج می شود . هنگام چرخش هوا در سیکلون ، ذرات درشت

شماتیک سیکلون

از مزایای این وسیله (غیر قابل استنشاق) به دلیل نیروی گریز از مرکز از جریان هوا جدا شده و در قسمت پایین وسیله جمع می شوند. ذرات ریزتر (قابل استنشاق) نیز همراه جریان هوا بطرف مجرای خروجی حرکت کرده و در صورت قرار دادن فیلتر در مسیر جریان هوا ،بر روی فیلتر به دام می افتد. نمونه برداری می توان به قیمت مناسب، سهولت استفاده، بی نیازی به مواد خاص و عدم احتمال ورود مجدد ذرات به جریان هوا اشاره کرد .

5- بابلرهای متخلخل: در این بطری ها لوله ورودی هوا در انتها به صورت یک بستر شیشه ای با سطح متخلخل درآمده و این امر باعث می گردد که هوای وارده از سطح متخلخل گذشته ایجاد حباب های بسیار ریزی نماید که در نتیجه سطح تماس گاز یا بخار را با محلول جاذب افزایش می دهند به همین دلیل بابلرهای متخلخل نسبت به بطری های ساده از کارآیی بالاتری برخورداند قابل ذکر است که روزنه های متخلخل در درجات مختلف ریز، متوسط، درشت و بسیار درشت ساخته شده اند.

 هر چه دانه های بستر ریزتر باشد مدت زمان تماس آلاینده با محلول بیشتر و افت فشار نیز بیشتر خواهد شد. هنگامی که تعداد بطری های نمونه گیر بابلر به صورت دوتایی به هم وصل شوند طول مسافتی که هوای داخل محلول جاذب طی می کند بیشتر و در نتیجه هوای آلوده بیشتری جذب می گردد.

6- کیسه هوا: این کیسه در اندازه ها، جنس ها و شکل های مختلف یافت می شوند و از محاسن آنها می توان به سبکی، غیر قابل شکستن و قیمت ارزان اشاره کرد. کیسه های نمونه برداری از تا حجم های 250 لیتر موجود است این کیسه ها با جنس های مختلف شامل پلی استر، تفلون، تدلار و یا دیگر فلوروکربن ها یافت می شوند. به منظور نمونه برداری از آلاینده های موجود در هوای محیط کار تنها کافی است که حجم مورد نظر از هوای محیط کار توسط پمپ (دستی یا الکتریکی) به درون کیسه منتقل می شود. از امتیازات کیسه نمونه برداری آن است که برای خروج هوا از آن احتیاجی به مکنده یا ابزار ویژه ای نیست. نکات زیر در مورد استفاده از کیسه ها باید رعایت شود :

• بررسی نشت کیسه ها
• برای نمونه برداری از مواد بسیار واکنش پذیر نباید استفاده شود
• حداکثر 80% ظرفیت کیسه ها را می توان جهت نمونه برداری مورد استفاده قرار داد

وسایلی که توسط آنها کیسه های هوا پر می شوند عبارتند از پمپ نمونه برداری فردی، سرنگ های تزریقی و استفاده از چمبر نمونه برداری .

 6- لوله زغال فعال: لوله های نمونه برداری کربن فعال به اشکال و  اندازه های مختلف ساخته شده اند. لوله ی پیشنهادی NIOSH دارای 7 سانتی متر طول و 6 سانتی متر قطر است. کربن فعال در لوله ها

لوله های معرف (گازیاب) Indicator Tubes

نتیجه گیری : به دو قسمت تقسیم می شوند وبین دو قسمت یک بخش 2 میلی متری با کف اوره تال پر شده است. مقدار کربن فعال 100 میلی گرم است که به دو قسمت 50 میلی گرمی تقسیم می شود .

• وسایل نمونه گیر مختلف هر کدام بسته به شرایط نمونه برداری و نوع نمونه مورد استفاده قرار می گیرند.
• از کیسه های نمونه برداری نباید برای نمونه برداری گرد و غبار و سایر آئروسل ها استفاده کرد .
• در بابلرهای متخلخل هر چه دانه های بستر ریزتر باشد مدت زمان تماس آلاینده با محلول بیشتر و افت فشار نیز بیشتر می شود.
• کربن فعال دارای ظرفیت بیشتری برای جذب و نگه داری گازها و بخارات هواست.

منابع:

• بهداشت حرفه ای دکتر علیرضا کوهپایی
• شناسایی عوامل شیمیایی زیان آور محیط کار مهندس مهدی قاسم خانی
• نمونه برداری و تجزیه آلاینده ها در هوا- جلد اول دکتر عبدالرحمن بهرامی
• روش های نمونه برداری و تجزیه آلاینده ها ی هوا- جلد سوم دکتر عبدالرحمن بهرامی
• روش ها و وسایل نمونه برداری از آلاینده های هوای محیط کار دکتر چوبینه

حتما بخوانید:

⇐ نمونه برداری فردی و محیطی با پمپ و فیلتر غشایی PVC

⇐ اصول نمونه برداری و اندازه گیری غلظت آلاینده ها در هوا

⇐ روش ها و تجهیزات نمونه برداری آلاینده های شیمیایی هوای محیط کار